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當(dāng)前位置:首頁資料下載IDS 骨切片 DT-1BON1000-96 說明書

IDS 骨切片 DT-1BON1000-96 說明書

發(fā)布時間:2021/2/7點(diǎn)擊次數(shù):1091

骨切片( Bone Slices)

【產(chǎn)品名稱】骨切片

【英文名稱】Bone Slices

貨號DT-1BON1000-96

預(yù)期用途】用于傳統(tǒng)染色法和培養(yǎng)基ELISACrossLaps)骨破壞重吸收的體外檢測

關(guān)鍵詞骨切片,Bone SlicesDT-1BON1000-96 IDS

產(chǎn)品簡介

骨是一種很有活力的組織,在人的一生中都在不斷地重建。現(xiàn)已證實(shí),在骨中存在一些特殊物質(zhì),能夠影響到破骨細(xì)胞的活性。每批骨切片通過重吸收檢測法來測試其質(zhì)量。在該檢測中,由骨切片上產(chǎn)生凹點(diǎn)證明破骨能力。隨后用培養(yǎng)基酶免吸附試劑盒Crosslaps檢測上清液。只有當(dāng)兩項(xiàng)測試都呈陽性時,該骨切片才能用于進(jìn)一步的重吸收檢測。破骨細(xì)胞產(chǎn)生凹點(diǎn)的活性通過人破骨重吸收方法檢測。對破骨重吸收的定量分析可以采用傳統(tǒng)的對凹點(diǎn)染色方法,亦可使用培養(yǎng)基酶免吸附檢測法Crosslaps,兩者關(guān)系見圖12。由于破骨細(xì)胞實(shí)驗(yàn)往往需要較大量的蛋白質(zhì),而從牛骨切片中提取的蛋白質(zhì)用于96孔板,IDS公司開發(fā)了能夠*適用于6122448孔板的骨皮質(zhì)切片。如圖3所示。將人破骨細(xì)胞分散覆蓋于牛骨皮質(zhì)片上,然后加入不同濃度的抗重吸收劑(A: 90 μM, B: 30 μM, C: 10 μM, D: 0 μM)。第6天取等量細(xì)胞培養(yǎng)上清液用于檢測膠原c端交聯(lián)肽(ctx)的量(培養(yǎng)基ELISA-CrossLaps,從骨片上轉(zhuǎn)移破骨細(xì)胞并且用阻凝蛋白蘇木精染色,形成可見的凹點(diǎn)(圖1)。

用這種6孔板大骨片(GBS)來提取破骨細(xì)胞蛋白,這些破骨細(xì)胞在骨上而非塑料上培養(yǎng),對蛋白質(zhì)的表達(dá)是有影響的(數(shù)據(jù)未列出)。要進(jìn)行破骨細(xì)胞的基因描述實(shí)驗(yàn)時,我們推薦使用這些底物提取RNA。從骨切片分離RNA的方案和人破骨細(xì)胞的培養(yǎng)方案可根據(jù)要求制定。【來源】

骨切片由牛股骨的皮質(zhì)部分制成,*適合96孔板,直徑6mm,大概200μm厚。

【儲存】

骨切片保存于4°C70%乙醇中。為了保持骨切片的質(zhì)量,應(yīng)縮短使用周期和避免室溫下放置。

【處理】

推薦在轉(zhuǎn)移至96孔板之前,先將骨切片置于含培養(yǎng)基的10%血清中清洗三次。

【培養(yǎng)】

重吸收實(shí)驗(yàn)一般持續(xù)72小時(見圖2)。然而在加入試劑到破骨細(xì)胞培養(yǎng)液中1624小時后,就可觀察到細(xì)微的變化了,甚至8小時后即可用相應(yīng)方法觀察到。

特征
與凹點(diǎn)染色和劃線不同,培養(yǎng)基酶免吸附法Crosslaps不要求破骨細(xì)胞培養(yǎng)的終止。因此,可以從相同的股切片中獲得幾個樣品,從而使互換性檢測特定物質(zhì)影響下的破骨細(xì)胞活性成為可能。材料的處置與常見細(xì)胞培養(yǎng)物的處置相同。

【訂購信息】

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英文名稱

中文名稱

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規(guī)格

IDS

Bone Slices

骨切片

DT-1BON1000-96

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【參考文獻(xiàn)】

  1. HENRIKSEN ET AL. AM J PATHOL 164:1537-1545 (2004).
  2. HOLLBERG ET AL. EXP CELL RES 279:227-238 (2002).
  3. IVASKA ET AL. J BIOL CHEM 30;279(18):18361-9 (2004).
  4. KARSDAL ET AL. AM J PATHOL 166:467-476 (2005).
  5. SCHALLER ET AL. J BONE MINER RES 19:1144-1153 (2004)
  6. STROUP ET AL. J BONE MINER RES 16:1739-1746 (2001).
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